Методы определения ферментативной активности

Методы определения ферментативной активности

Эти свойства выделенной культуры изучают при засеве уколом в столбик желатины. На вторые-третьи сутки роста при 22-23° холерные вибрионы дают воронкообразное разжижение желатины с сужением книзу. Однако многие холероподобные вибрионы также разжижают желатину.

Чувствительность к бактериофагу. При проведении внутривидовой дифференциации между классическими холерными и Эль Тор вибрионами первостепенное значение имеет определение чувствительности исследуемых культур к фагу IV группы Мукерджи (цельному и разведенному до 1:1000 и более). То предельное разведение, в котором фаг еще вызывает лизис культуры классических холерных вибрионов, взятых для сравнительного исследования, принято обозначать RTD. В отличие от классических холерных вибрионов Эль Тор вибрионы, как правило, не лизируются фагом IV группы, в некоторых случаях - только цельным или в небольших разведениях.

Чувствительность выделенной культуры к бактериофагу лучше определять на плотной питательной среде по одной из следующих методик:

1. Чашку со щелочным агаром разделяют на секторы (по числу разведений фага) и на поверхность каждого из них наносят петлей небольшой газон 2-3-часовой культуры из бульона или пептонной воды. После подсыхания газонов в центр их вносят петлей по капле фага, цельного и разведенного. Посев в последнем секторе служит контролем культуры. В месте нанесения фагов уже через 3-5 ч отмечается лизис чувствительной культуры. Иногда в связи с появлением вторичного роста возникают трудности в учете результатов.

2. Более четкие результаты определения чувствительности культуры к фагу получают при использовании метода агаровых слоев. На пластинку 1,5%-иого агара в чашке Петри выливают из пробирки 2,5-3 мл расплавленного и остуженного до 45-50° 0,7%-ного агара, в который добавлены 1-2 капли одномиллиардной взвеси суточной агаровой культуры исследуемого штамма.

Если вам понравилась статья " Методы определения ферментативной активности ", то мы очень рады что смогли вам помочь, если вы захотите в будущем прочитать статью Методы определения ферментативной активности, занесите наш сайт по Уходу за ребенком к себе в закладки.